Половые гормоны (исследования репродуктивной функции). Лабораторная диагностика Методика определения 17 он прогестерон инструкция

Прогестерон – это женский половой гормон. Его главная задача – поддержание беременности у собак.

В каких случаях назначают исследования уровня прогестерона?

• оценка аспектов функционирования яичника у сук и кошек;
• определение времени овуляции для определения времени вязки (у сук);
• предсказания даты родов;
• подтверждение наличия остатка ткани яичника;
• оценка функции желтого тела в случаи аборта;
• выявление бессимптомной течки;
• выявление наличия лютеиновых кист и др.

В ветеринарной практике чаще всего исследуются уровни прогестерона для определения оптимального времени вязки. Это крайне важно при искусственном осеменении замороженной или охлажденной спермой, или когда кобель находится на большом расстоянии и нужно точно знать дату вязки, чтобы привезти суку или кобеля.

Как подготовить животное к исследованию?

В особой подготовке необходимости нет. Забор крови производят обычно утром натощак. Основное условие — животное не должно принимать препараты, влияющие на уровень прогестерона.

В какое время необходимо проводят исследование?

Исследование уровня прогестерона можно проводить каждые 2-3 дня, начиная с 3-5 дня от начала течки. Обычно, анализ готов в течение 24-х часов. Среднее время выполнения анализа – до 4 часов.

Каким методом проводится исследование?

Исследование проводят методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Это количественный метод определения уровня прогестерона в сыворотке крови. Исследование выполняется в лабораторных условиях с использованием соответствующего прибора иммуноферментного анализатора с применением специальных реагентов.

Принцип определения прогестерона основан на использовании конкурентного метода ИФА. На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к прогестерону. Прогестерон исследуемого образца конкурирует с конъюгированным прогестероном за связывание с антителами на поверхности лунки. В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина происходит окрашивание растворов в лунках. Интенсивность окраски, которую определяют на анализаторе, обратно пропорциональна концентрации прогестерона в исследуемом образце.

Как интерпретировать результаты анализа?

Количественное значение прогестерона в крови определяют в до- и постовуляторный периоды. Уровень прогестерона в сыворотке крови, как у разных собак, так и у одной и той же особи (от цикла к циклу) может меняться достаточно быстро.

Средние показатели представлены в таблице .

Результаты в разных лабораториях могут отличаться. Это зависит от настроек аппарата и реагентов. Точную интерпретацию результатов должен проводить ветеринарный врач, имеющий соответствующую квалификацию и опыт работы.

Оптимальные сроки вязки:

При достижении уровня прогестерона 15,9 нмоль /л (5 нг/мл), вязка осуществляется через 24-48 часов.

Искусственное осеменение с помощью охлажденной спермы проводится через 4 дня после достижения уровня прогестерона 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) или 48 часов после отметки 15,9 нмоль/л (5 нг/мл).

Искусственное осеменение с помощью замороженной спермы выполняется через 5 дней после отметки 7,95 нмоль/л (2,5 нг/мл) или 72 часа после отметки 15,9 нмоль/л (5 нг/мл)

Какая польза данного исследования?

Определения сроков овуляции позволяет увеличить не только процент удачных вязок или искусственного осеменения, но также и плодовитость. А дополнительные методы исследования, основанные на использовании влагалищных мазков и

Назначение: набор предназначен для количественного определения 17α-гидроксипрогестерона (17α-OH прогестерона, 17OHP) в образцах человеческой сыворотки или плазмы методом конкурентного иммуноферментного анализа. Диапазон измерения: 0.03-10 нг/мл. Чувствительность: 0.03 нг/мл. Приложения теста: 17OHP представляет собой стероид, производимый в надпочечниках и гонадах. Подобно другим стероидам, 17OHP синтезируется из холестерина, пройдя последовательно через несколько ферментативных реакций. Он является непосредственным предшественником 11-дезоксикортизола (11-ДК), который превращается в кортизол. Так как 11-ДК продуцируется при 21-гидроксилировании 17OHP, измерение 17OHP является непрямым показателем 21-гидроксилазной активности. При дефиците активности 21-гидроксилазы происходит снижение преобразования 17OHP в 11-ДК, что блокирует нормальный синтез кортизола, и 17OHP накапливается в больших количествах и шунтируется в цикл биосинтеза андрогенов. В результате большие количества андрогенов могут вызывать прогрессирующую тяжёлую вирилизацию, начиная с фетального состояния и младенчества. И при дефиците этого фермента развивается врожденная гиперплазия надпочечников (ВГН). 21-гидроксилаза требуется также для синтеза альдостерона, отсюда, примерно 50% пациентов с дефицитом 21-гидроксилазы страдают от потенциально смертельной потери солей. Дефицит 21-гидроксилазы – наследственное аутосомно-рецессивное заболевание, которое встречается у новорожденных с частотой 1:500 - 1:5000. Ранняя диагностика очень важна для выявления новорожденных, страдающих ВГН, клинически не проявляющейся, но требующей лечения в неонатальный период, а также для выявления причины неопределенных половых органов у детей. Поздняя диагностика может приводить к вирилизации у девочек, ускоренному созреванию скелета и преждевременному развитию вторичных половых признаков у мальчиков. Правильное лечение может сохранить жизнь ребенка и позволить таким детям нормально расти и развиваться. Из-за относительно высокой частоты этого заболевания и его потенциальной тяжести в некоторых географических регионах введена программа скрининга крови новорожденных на 17OHP. Концентрация 17α-гидроксипрогестерона (17α-ОНР) в сыворотке или плазме является значимым рутинным маркером для диагностики ВГН. При этом нарушении метаболизма необходима стероид-замещающая терапия. Адекватность лечения контролируют, определяя концентрацию циркулирующего 17α-ОНР. Уровни 17OHP зависят от возраста, с пиковым значением сразу после рождения. В течение первой недели жизни уровень 17OHP падает примерно в 50 раз по сравнению с концентрацией в пуповинной крови и достигает нормального уровня для взрослых в течение 2–7 дней. Следовательно, нельзя выполнять сбор образца раньше, чем на 3-й день после рождения. Уровень 17Р повышен в 2-3 раза у недоношенных и больных доношенных детей без ВГН. Следовательно, для таких детей необходимо использовать другой дискриминационный уровень. Кроме того, определение 17OHP в ответ на парентеральное введение синтетического АКТГ проводят для подтверждения предполагаемого диагноза «частичного» дефицита 21-гидроксилазы, как возможной причины женского гирсутизма и бесплодия. Как и в случае с кортизолом, уровень 17OHP в сыворотке имеет АКТГ-зависимый суточный ритм с пиковым значением утром и самым низким уровнем ночью. Кроме того, яичниковая продукция 17OHP возрастает во время лютеиновой фазы менструального цикла, в итоге уровень 17OHP в лютеиновую фазу намного выше, чем во время фолликулярной фазы. Концентрация 17Р повышается во время беременности в материнской и фетальной крови. Концентрация 17OHP выше границы нормального диапазона и/или после стимуляции АКТГ характерна также и для других форм гиперплазии надпочечников, включая дефицит 11-гидроксилазы (Р450с11), дефицит 17,20-лиазы (Р450с17) и дефицит 3β-гидроксистероид дегидрогеназы (3β-HSD). При дефиците 3βHSD, как причины женского гирсутизма, продукция 17OHP теоретически снижена, а рост уровня 17OHP предположительно происходит за счёт превращения предшественников вне надпочечников. Соотношение этих предшественников, в частности 17-гидроксипрегненолона и 17OHP, может быть использовано в диагностических целях.

Цена: по запросу

Вы можете добавить товар в корзину, указав количество

Производитель: Хема-медика

Страна: Россия

Ед. изм.: набор

Вид упаковки: картонная коробка

Артикул: K217

Описание

Количественное определение концентрации прогестерона в cыворотке (плазме) крови методом твердофазного иммуноферментного анализа

Функциональное назначение

Определение прогестерона основано на использовании конкурентного иммуноферментного анализа. На внутренней поверхности лунок планшета иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к прогестерону. Прогестерон из образца конкурирует c конъюгированным прогестероном за связывание с антителами на поверхности лунки. В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание растворов в лунках. Интенсивность окраски обратно пропорциональна концентрации прогестерона в исследуемом образце. Концентрацию прогестерона в исследуемых образцах определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности от содержания прогестерона в калибровочных пробах

Технические характеристики

Метод: твердофазный иммуноферментный анализ.
Проба: сыворотка, плазма крови.
Специфичность 100%.
Чувствительность: минимальная достоверно определяемая концентрация не превышает 0,5 нмоль/л.
Коэффициент вариации результатов не превышает 8%.
Линейность: в диапазоне концентраций 1-300 нмоль/л ± 10%.
Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 40 исследуемых образцов, 7 калибровочных проб и 1 пробы контрольной сыворотки (всего 96 определений).
Состав набора:
1. Планшет 96-луночный полистироловый, стрипированный, готов к использованию - 1 шт.
2. Калибровочные пробы на основе сыворотки крови человека, содержащие известные количества прогестерона - 0; 1; 3; 10; 30; 100; 300 нмоль/л, готовы к использованию (калибровочная проба 0 нмоль/л - 2 мл, остальные - по 0.8 мл каждая) прозрачные жидкости пурпурного цвета (калибровочная проба 0 - прозрачная бесцветная жидкость) - 7 шт.
3. Контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с известным содержанием прогестерона, готова к использованию, прозрачная бесцветная жидкость, 0,8 мл х 1 флакон.
4. Конъюгат, готов к использованию, прозрачная жидкость пурпурного цвета, 22 мл х 1 флакон.
5. Раствор субстрата тетраметилбензидина (ТМБ), готов к использованию,прозрачная бесцветная жидкость, 11 мл х 1 флакон.
6. Концентрат отмывочного раствора, 21х-кратный, прозрачная бесцветная жидкость, 22 мл х 1 флакон.
7. Стоп-реагент, готов к использованию, прозрачная бесцветная жидкость, 11 мл х 1 флакон.
8. Бумага для заклеивания планшета - 2 шт.
9. Инструкция по применению - 1 шт.
10. Паспорт контроля качества - 1 шт.
Набор хранить при температуре +2…+8 °C в течение всего срока годности, указанного на упаковке, замораживание недопустимо. Приготовленный отмывочный раствор хранить при комнатной температуре (+18…+25 °C) не более 5 суток или при температуре +2…+8 °C не более 30 суток. Калибровочная сыворотка после вскрытия пригодна в течение 2 месяцев.
Величину оптической плотности измеряют при длине волны 450 нм.
Зарегистрировано в Росздравназдзор.

Исследование проводится на 19-23 день менструального цикла (за 5-7 дней до предполагаемой менструации), если другие сроки не указаны лечащим врачом. За 3 дня до взятия крови исключить физические нагрузки. Кровь рекомендуется сдавать строго в утренние часы с 7 до 11 часов, натощак (не менее 8 часов после приема пищи, воду пить в обычном режиме), в состоянии покоя не менее 30 минут, до приема лекарственных препаратов. Если отмена препаратов невозможна, необходимо информировать лечащего врача. Прием синтетических аналогов прогестерона (дюфастон) не влияет на результат исследования.

• Описание

«ПРОГЕСТЕРОН-ИФА»

Прогестерон — женский половой гормон, его основным органом-мишенью является матка (пролиферация эндометрия, облегчение имплантации оплодотворенной яйцеклетки). Синтезируется желтым телом, во время беременности — плацентой, некоторое количество вырабатывается яичками и надпочечниками. В фолликулярную фазу его количество в крови минимальное, после овуляции его уровень повышается, стимулируя утолщение эндометрия и готовность к имплантации оплодотворенной яйцеклетки. При беременности гормон снижает чувствительность матки к веществам, вызывающим ее сокращение, его концентрация постепенно повышается с 5-й по 40-ю неделю беременности, увеличиваясь в 10-40 раз. Исследование назначают для диагностики нарушений менструального цикла, наблюдения за пациентами с индуцированной овуляцией, оценки риска прерывания беременности на ранних сроках.

17-ОН-прогестерон вырабатывается надпочечниками и является одним из регуляторов половой функции и менструального цикла, влияет на способность к зачатию и вынашиванию ребенка. При нормальных условиях уровень его в крови незначителен, и в женском организме подвержен значительным колебаниям в связи с менструальным циклом и беременностью.

В первую фазу цикла 17-ОН-прогестерон в незначительном объеме выделяется яичниками, к середине цикла его уровень несколько возрастает и остается неизменным на протяжении всей второй фазы.

Если произошло оплодотворение и имплантация зародыша – уровень гормона начнет понемногу возрастать, если же зачатия не произошло, значение 17-ОН-прогестерона вновь снизится до минимума на начало новой фазы цикла.

Когда назначают анализ

Иногда, при подозрении на гормональные сбои или гиперплазию (разрастание) коры надпочечников назначается анализ крови на уровень 17-ОН-прогестерона.

Обычно это происходит при:

• бесплодии у женщин с наличием признаков гирсутизма (повышенное оволосение тела),
• при нарушения менструального цикла,
• при подозрении на опухоли надпочечников.
• иногда анализ крови назначают детям при подозрении на врожденную гиперплазию коры надпочечников (адреногенитальный синдром).

Как проводят анализ

Женщинам исследование на уровень 17-ОН-прогестерона проводят в первую фазу цикла, через 3-5 суток с начала менструации. Детям анализ проводят в любой день, утром, натощак.

Нормальные значения 17-ОН-ПГ Что значат результаты

Может быть три варианта анализа:

Уровень 17-ОН-прогестерона в норме.

Значит гормональные отклонения не связаны с корой надпочечника или яичниками,

Уровень гормона повышен.

Уровень гормона может повышаться при опухолях яичника или надпочечников.

При легких формах повышения гормона обычно проявляются нарушения менструального цикла и бесплодие.

Повышение уровня 17-ОН-прогестерона бывает при врожденной гиперплазии коры надпочечников у детей и у взрослых.

У детей обычно это генетически обусловленная патология, передается по аутосомно-рецессивному типу как дефект одного из ферментов, которые позволяют активно метаболизироваться гормонам. В результате сбоя в этой цепочке происходит усиление синтеза и накопление тестостерона . При рождении выявляются признаки вирилизации – усиления мужских половых признаков у мальчиков, с увеличением пениса и мошонки, у девочек – признаки ложного гермафрдитизма – увеличение клитора и половых губ, ошибочно принимаемые за пенис с мошонкой. У детей обоего пола развиваются еще и обменные нарушения с тяжелыми потерями солей калия и натрия.

Уровень 17-ОН-прогестерона понижен.

Такое состояние возникает при Аддисоновой болезни , врожденной или приобретенной недостаточности надпочечников. Кроме того, понижение уровня гормона у мужчин бывает при состоянии ложного гермафродитизма – когда нарушен синтез прогестерона и из-за этого нарушено нормальное формирование тела по мужскому типу.

Общие сведения о гормоне

17-ОН-прогестерон или гидроксипрогестерон – это один промежуточных продуктов метаболизма гормонов, относящийся к группе стероидов.

Он образуется из двух предшественников – прогестерона и 17-гидроксипрегненолона, путем сложных трансформаций в надпочечниках превращающийся в гормон кортизол.

Гидроксипрогестерон может продуцироваться также в плаценте и половых органах, превращаясь там еще и в андростендион (это вещество является исходным для синтеза либо мужского полового гормона тестостерона, либо женского полового гормона –